RNA聚合酶(RNA polymerase)是以一條DNA鏈或RNA為模板,三磷酸核糖核苷為底物、通過(guò)磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶,因為在細胞內與基因DNA的遺傳信息轉錄為RNA有關(guān),所以也稱(chēng)轉錄酶。
特點(diǎn):
RNA聚合酶催化RNA的合成,其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點(diǎn):
①以DNA為模板;
②催化核苷酸通過(guò)聚合反應合成核酸;
③聚合反應是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯鍵的反應;
④以3’→5’方向閱讀模板,5’→3’方向合成核酸;
⑤按照堿基配對原則忠實(shí)轉錄模板序列。
分類(lèi):
通??筛鶕锏念?lèi)別,將RNA聚合酶分為原核生物RNA聚合酶、真核生物RNA聚合酶。
原核生物和真核生物的RNA聚合酶有共同特點(diǎn),但在結構、組成和性質(zhì)等方面又不盡相同。
(1)原核生物RNA聚合酶 研究得最清楚的是大腸桿菌RNA聚合酶。該酶是由五種亞基組成的六聚體(α2ββ'ωσ)分子量約500 000。其中α2ββ'ω稱(chēng)為核心酶(coreenzyme),σ因子與核心酶結合后稱(chēng)為全酶(holoenzyme)。
σ因子的主要作用是識別DNA模板上的啟動(dòng)子,其單獨存在時(shí)不能與DNA模板結合,與核心酶結合成全酶后,才可使全酶與模板DNA上的啟動(dòng)子結合。當它與啟動(dòng)基因的特定堿基序列結合后,DNA雙鏈解開(kāi)一部分,使轉錄開(kāi)始,故σ因子又稱(chēng)起始因子。已經(jīng)鑒定出大腸桿菌有7種σ因子,不同的σ因子可以競爭結合核心酶,以決定哪個(gè)基因被轉錄。其中σ70(數字表示其分子量大?。﹨f(xié)助識別管家基因的啟動(dòng)子。環(huán)境變化可以誘導產(chǎn)生特定σ因子,啟動(dòng)特定基因的轉錄。
核心酶只有一種,參與整個(gè)轉錄過(guò)程,催化所有RNA的轉錄合成。
其他原核生物的RNA聚合酶在結構和功能上均與大腸桿菌相似??股乩F交蚶C顾乜梢蕴禺愐种圃松锏腞NA聚合酶,成為抗結核菌治療的藥物。它專(zhuān)一性地結合RNA聚合酶的β亞基。若在轉錄開(kāi)始后才加入利福平,仍能發(fā)揮其抑制轉錄的作用,這說(shuō)明β亞基足在轉錄全過(guò)程都起作用的。
(2)真核生物RNA聚合酶 真核生物具有3種不同的細胞核RNA聚合酶,分別是RNA聚合酶I(RNA pol I)、RNA聚合酶Ⅱ(RNA pol II)和RNA聚合酶Ⅲ(RNA pol llI).這三種RNA聚合酶不僅在功能和理化性質(zhì)上不同,而且對α一鵝膏蕈堿(一種毒蘑菇含有的環(huán)八肽毒素)的敏感性也不同。
真核生物的3種細胞核RNA聚合酶的結構比原核生物復雜,3種RNA聚合酶都有2個(gè)不同的大亞基、2個(gè)類(lèi)α亞基和1個(gè)類(lèi)ω亞基,分別與大腸桿菌核心酶的β和β’、2個(gè)α亞基和ω亞基同源。除上述5個(gè)亞基外,三種RNA聚合酶還各含7~11個(gè)小亞基。合成RNA時(shí),原核細胞依賴(lài)RNA聚合酶的各個(gè)亞單位就能完成轉錄過(guò)程,而真核細胞還需要一些蛋白質(zhì)因子參與,并對轉錄產(chǎn)物進(jìn)行加工修飾。
真核生物線(xiàn)粒體有自己的RNA聚合酶,催化合成線(xiàn)粒體mRNA、tRNA、rRNA。線(xiàn)粒體RNA聚合酶在功能和性質(zhì)上與原核細胞RNA聚合酶類(lèi)似,其活性也可被利福平或利福霉素抑制。