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液體培養基如何接種,你知道嗎?
  • 發(fā)布日期:2022-10-28      瀏覽次數:993
    •   液體培養基接種是用接種環(huán)、移液器或吸管等工具,將菌體或菌液移至試管、三角瓶等容器中的液體培養基中的一種接種方法。其操作與前面斜面接種基本相同,但應注意:液體培養基試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養液流出;加入菌體時(shí),應使接種環(huán)與管內壁輕輕研磨,使菌體擦下,塞好棉塞后,將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶,使菌體混合均勻。
        試管液體接種
        試管液體接種是將一定體積的樣品混懸液加入到盛有特定液體培養基的試管內,或將一定體積、按標準規定條件下培養過(guò)的培養液接入盛有特定液體培養基的試管內(有時(shí)是指接種環(huán)取一環(huán),或移液管移液器移取一定的體積,例如0.1ml、1ml等)。涉及試管液體接種的操作有MPN法檢測大腸菌群/大腸桿菌,以及沙門(mén)氏菌、單增李斯特氏菌的二次增菌轉接操作等。
       ?、儆镁凭尴静僮髋_面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側,靠近酒精燈放置。將需要進(jìn)行液體轉接的試管插在試管架上,置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調至合適的刻度放于右手附近的架子上。廢物缸放于右手能觸及的范圍內。
       ?、邳c(diǎn)燃酒精燈,左手于酒精燈火焰附近打開(kāi)移液器吸頭盒,右手持移液器用力插取吸頭兩下以防吸頭松動(dòng)脫落,拔出移液器并蓋上移液器吸頭盒盒蓋。左手取待轉接液體試管,試管底部位于左手手心,移液器吸頭和試管口應在酒精燈火焰周?chē)臒o(wú)菌區域之內。
       ?、蹖⒃嚬苌煜蛴沂?。右手食指,中指,無(wú)名指握住移液器,拇指靠在移液器按鈕上,小指和掌心下緣合圍夾住試管帽并用力拔出。如果操作者的手比較小,可以靠食指無(wú)名指和小指握住移液器,拇指仍靠在液體按鈕上。而中指向外伸,靠中指內側和食指、無(wú)名指外側夾住試管帽。將試管口和移液器吸頭靠近火焰,試管口灼燒一周,在火焰附近將吸頭剛好伸入試管口,抵住試管內壁下側,同時(shí)按住移液器按鈕至一檔(輕微推不動(dòng))。不要將移液器吸頭伸到試管底部,而應傾斜試管使液面傾斜至試管口附近并沒(méi)過(guò)吸頭頂端。右手拇指緩慢松開(kāi),使液體緩緩吸入洗頭,注意不要吸入空氣。如果有空氣吸入,必須將液體壓回試管重新吸取。當右手拇指松開(kāi)時(shí),撤離移液器,注意吸頭需盡量一直圍繞在在酒精燈火焰附近,并且吸頭務(wù)必保持向下姿勢以防止液體倒流入移液器內部引起污染。
       ?、芪暌后w后,將移液器撤離試管,移液器吸頭移到酒精燈火焰的遠離操作者的一側,將試管口在火焰上灼燒滅菌。液體培養基
       ?、轀缇?,右手小指迅速將試管帽蓋上,此時(shí)移液器吸頭仍然要在火焰形成的無(wú)菌區域內,不可離酒精燈火焰太遠。蓋上試管帽將試管歸位。
       ?、拮笫秩〈D接入液體的試管,右手保持移液器吸頭在酒精燈火焰附近。
       ?、哂沂直3治找埔浩髯藙萑∠略嚬苊辈⒆茻芸?。將吸頭抵靠在試管口的內壁上,緩緩推動(dòng)移液器按鈕至底(推至第二檔,使殘存在吸頭頂端的液體也流出)。推出液體時(shí)注意不要將吸頭深入試管底部,也不要用力推導致液體飛濺。
       ?、嘧笫謱⒃嚬芸诳拷鹧鏈缇?,移液器吸頭移到酒精燈火焰的另一側。再次灼燒試管口
       ?、嵊沂直3治找埔浩髯藙輰⒃嚬苊鄙w上,將試管歸位。移取液體完畢后,按壓移液器滑動(dòng)桿使吸頭脫落至廢物缸,移液器放回架子。熄滅酒精燈,將臺面消毒并收拾干凈。
        三角瓶液體接種
        相對于試管的液體接種培養,三角瓶接種培養的優(yōu)勢在于通氣效果好。多見(jiàn)于霉菌或一些細菌的復壯培養或者搖床培養等。操作與前面提到的液體試管接種操作基本相同,最后將液體加入三角瓶的時(shí)候,三角瓶?jì)A斜,移液器吸頭抵在三角瓶的內壁,緩緩將液體加入,避免噴濺和氣泡。液體培養基
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