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胎牛血清對環(huán)境有何要求?
  • 發(fā)布日期:2020-05-21      瀏覽次數:963
    •   胎牛血清細胞在體外培養時(shí),必須營(yíng)造一個(gè)與體內相適應的培養環(huán)境。細胞本身是一個(gè)生命,是組成機體的zui小生命單位,如果細胞長(cháng)期在較高內毒素含量的培養基中生長(cháng),久而久之,細胞的正常生長(cháng)繁殖受到干擾,甚至zui終導致變異死亡。
        為何牛血清中會(huì )污染噬菌體,其危害表現在什么地方
        噬菌體是感染細菌的病毒,牛血清中污染噬菌體,表明該牛血清曾受到細菌污染,而受細菌污染過(guò)的牛血清,不僅對固有的營(yíng)養成分有所損害,更重要的是牛血清中會(huì )因細菌污染而含有許多毒素,對細胞生長(cháng)不利。牛血清是否污染噬菌體是檢測牛血清在整個(gè)加工過(guò)程中有否受到外源性污染的一個(gè)重要指標。
        胎牛血清是細胞培養中zui重要的原輔材料,牛血清若污染支原體會(huì )使培養的細胞受感染。導致細胞病變而死亡,使科研和生產(chǎn)工作無(wú)法繼續進(jìn)行。
        胎牛血清冷凍管應如何解凍
        取出冷凍管后,必須立即放入37℃水浴中快速解凍,輕搖冷凍管使其在一分鐘內全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。此外,冷凍管由液氮罐中取出解凍時(shí),必須注意安全,以預防冷凍管爆裂。
        細胞冷凍管解凍培養時(shí),是否應馬上去除DMSO
        除少數特別注明對DMSO敏感的細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,直接放入含有10%血清的新鮮培養基的瓶中即可。待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO,避免離心后損傷細胞。
        培養原代細胞中出現小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
        胎牛血清細胞培養中如何防止黑點(diǎn)生成
        1. 盡可能地減少血清凍融次數。
        2. 培養基無(wú)需37℃水浴。
        3. 培養基保持*PH值7.0- 7.2。
        4. 嚴格控制配制培養基的水質(zhì),容器定期刷洗。
        5. 胎牛血清掌握細胞傳代的*時(shí)機,細胞切勿生長(cháng)過(guò)老。
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