琥珀酸脫氫酶存在于所有有氧呼吸細胞，和線(xiàn)粒體膜牢固結合，是三羧酸循環(huán)中唯.一與內膜結合的酶，是脫氫酶中最重要的酶。迄今為止，已從多種原核和真核組織中分離純化出這種酶，為該酶的酶學(xué)研究奠定了基礎。作為膜內酶，琥珀酸脫氫酶與具有脂雙層結構的線(xiàn)粒體膜結合得比較緊密，很難溶解下來(lái)，而且其一旦離開(kāi)膜后，暴露在空氣中會(huì )很快失活，因此其提純難度很大。1950年我國著(zhù)名生物化學(xué)家王應睞、鄒承魯、汪靜英等開(kāi)展對膜蛋白琥珀酸脫氫酶的研究，經(jīng)過(guò)反復實(shí)驗最后以正丁醇抽提法成功地把琥珀酸脫氫酶從鼠肝組織線(xiàn)粒體膜上溶解下來(lái)，得到了高純度的水溶性琥珀酸脫氫酶，其活力比同期國外報道者高出1倍以上，從而奠定了我國在琥珀酸脫氫酶研究領(lǐng)域的領(lǐng).先地位。其后，Davis等（1971、1977）使用NaClO4從牛心線(xiàn)粒體溶解下此酶；TsukahoHattori和TadashiAsahi（1982）選用離子型去垢劑脫氧膽酸鈉從番薯根線(xiàn)粒體提取SDH；Suraveratum等（2000）對惡性瘧原蟲(chóng)的琥珀酸脫氫酶進(jìn)行了純化；夏玉鳳等（2000）以玉米黃化苗為生物材料，通過(guò)差速離心獲得線(xiàn)粒體，使用超聲波將其破碎，用2%TritonX-100溶膜，超速離心，硫酸銨沉淀，DEAE-C32層析純化琥珀酸脫氫酶；辛明秀等（2004）用常規酶學(xué)方法從嗜冷酵母（Y18）中分離純化出有催化活性的琥珀酸脫氫酶。

琥珀酸脫氫酶是直接連在電子傳遞鏈上的，氫受體是FAD而不是NAD+，它使琥珀酸氧化為延胡索酸過(guò)程中所產(chǎn)生的FADH2與酶結合，將來(lái)自FADH2的兩個(gè)電子直接傳遞給酶的Fe3+?，F有研究表明，琥珀酸脫氫酶由α、β兩個(gè)亞基組成，α亞基相對分子質(zhì)量為70.0×103，含有FAD和兩個(gè)鐵硫簇；β亞基相對分子質(zhì)量為27.0×103，含有一個(gè)鐵硫簇。

琥珀酸脫氫酶能通過(guò)一系列人工電子受體，如與PMS（吩嗪二甲酯硫酸鹽），DCPIP（2，6-二氯酚靛酚）等發(fā)生反應催化琥珀酸的氧化，而借助這些中間產(chǎn)物的顏色變化，通過(guò)分光光度計檢測即可加以定量反映，其反應式為：①Succinate+PMS→Fumarate+PMSH2；②PMSH2+DCPIP→PMS+DCPIPH2。DCPIP呈藍色，標準的吸收光譜在600nm處，這種色澤可因其還原而漸次變淡，從而600nm處的光密度的變化與DCPIP含量成正比，測定2.6-DPIP的還原速度可以推算出SDH的活力。一分子DCPIP被還原，即代表一分子琥珀酸被氧化。故可測定此反應系統在600nm處的吸收光度變化，來(lái)計算SDH的活性。SDH活性計算：（標準－測定）/標準=μmol/min/mg。

以鐵氰.化鉀[K3Fe（CN）6]和琥珀酸鈉為底物，使琥珀酸脫氫酶催化反應將鐵氰化.鉀還原為亞鐵氰.化鉀[K4Fe（CN）6]，K4Fe（CN）6再與Fe3+作用生成普魯士藍，在700nm波長(cháng)測定吸光值，以檢測普魯士藍之生成量，作為琥珀酸脫氫酶的還原力，吸光值愈高表示琥珀酸脫氫酶活力愈強。

無(wú)色TTC（2，3，5-氯化三苯基四唑）作為人造受氫體，它在細胞呼吸過(guò)程中接受氫，還原成三苯基甲膳（TF）。后者以紅色晶體的形式存在于細胞內，采用有機溶劑（如甲苯、乙.酸乙醋、三.氯甲烷、丙酮或乙醇等）進(jìn)行萃取。萃取液測定485nm吸光度后，以TTC還原量表示脫氫酶活性，根據標準曲線(xiàn)計算TF生成量，進(jìn)而求出TTC-脫氫酶活性。

MTT是一種黃顏色的染料?；罴毎€(xiàn)粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT，同時(shí)在細胞色.素C的作用下生成藍色（或藍紫色）不溶于水的甲臜（Formazana），經(jīng)異丙醇作用顆粒溶解顯色。在通常情況下，甲臜生成量與活細胞數成正比，因此可根據光密度570nm處OD值推測出活細胞的數目。

NBT易溶于水，呈淡黃色，以NBT為受氫體，接受由琥珀酸鈉鹽被酶作用而脫下的氫，進(jìn)而形成紫藍色的沉淀，于反應體系中加入PMS，混勻，37℃保溫30min，之后加入TCA終止反應。加異丙醇溶解顯色，混勻，即可于548nm測OD值。規定：30min內548nm下OD值為1.0時(shí)的酶量為1個(gè)活力單位。比活力=活力單位數/毫克蛋白。