收到細胞株包裹時(shí)，請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即通知。細胞株請盡速開(kāi)始培養， 或立即冷凍保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。

冷凍細胞解凍程序:

1.根據細胞說(shuō)明書(shū)來(lái)配置培養基，不同的細胞株適應的培養基不同，請務(wù)必按細胞需求來(lái)配置。

絕大多數的細胞均無(wú)法立即適應不同的基礎培養基或不同的血清種類(lèi)，所以當細胞換成你們自己的培養基生長(cháng)狀態(tài)變差或者速度變緩的時(shí)候，不要著(zhù)急，可以靜養一段時(shí)間。給細胞一個(gè)適應的時(shí)間，不要一日看三回，操之過(guò)急；如實(shí)驗確實(shí)緊張，可以使用中喬新舟細胞株*培養基，此培養基是按細胞精心優(yōu)化，種類(lèi)豐富，適合中喬新舟任意一株細胞的培養。若因實(shí)驗需要，必須有所不同時(shí)， 請務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養基組成，確定細胞生長(cháng)適應后，方進(jìn)行實(shí)驗。

2.FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據細胞說(shuō)明書(shū)選擇相應的血清 ，這點(diǎn)很重要。

細胞復蘇的方法：

1.將培養基置于37 °C 水槽中回溫， 回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之， 移入無(wú)菌操作臺內。

2.取出冷凍管， 立即放入37 °C 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿， 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺。

3.依據細胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺內取10 ml 培養基加至T25 或T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養基，混合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養箱培養。

4.對絕大多數細胞而言，1 % 以下的冷凍保護劑DMSO，不會(huì )對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍的 細胞中去除，待第二天確定細胞生長(cháng)或貼附良好后再去除即可。

5.對極少數因對DMSO 敏感或會(huì )造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO ， 去除DMSO的方法如下：可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養基，將細胞均勻混合后，轉移至培養瓶中，再放入37 °C， 5 % CO2 培養箱培養。

活細胞的處理方式︰

1. 細胞在寄送過(guò)程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T25 flask 均加滿(mǎn)培養基。收到后，請檢查flask 外觀(guān)，并于顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)和有無(wú)污染現象，若有任何問(wèn)題，不要打開(kāi)蓋子，請立即通知我們。

2. 將原封的T25 flask細胞 靜置于細胞 培養箱中，讓細胞穩定一下，并讓運送過(guò)程中少數脫落的細胞可再附著(zhù)生長(cháng)。2-4小時(shí)后，無(wú)菌操作箱內取出flask內之培養基，僅留約5-10ml 培養基于flask 內，如無(wú)需傳代，請置于培養箱中繼續培養，如細胞已達到85%以上的密度，請立即將細胞做傳代處理。