凋亡試劑盒（綠色熒光）

凋亡試劑盒（綠色熒光）

凋亡試劑盒（綠色熒光）

說(shuō)明

一般描述

廣泛使用的方法用于確定凋亡，包括基于瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析以及基于3H-胸苷或5-溴-2′-脫氧-尿苷的DNA片段檢測。該方法包含在特定的細胞群中將片段化的低分子量DNA與未片段化的高分子量DNA進(jìn)行分離。因此，這些方法并不提供關(guān)于在特定細胞群或特別是組織切片中某個(gè)獨立細胞命運的信息?；蛘?，獨立的凋亡細胞可能因其特征性的核染色質(zhì)堆疊和片段而可通過(guò)顯微鏡進(jìn)行識別，但這種方法具有主觀(guān)性并受限于形態(tài)發(fā)生最大變化這一相對窄的時(shí)間窗口。

凋亡的標志是DNA的降解，而這在早期是對核小體間DNA連接體區域是有選擇性的。DNA的切割可能會(huì )產(chǎn)生雙鏈和單鏈的DNA斷裂（切口）。兩種類(lèi)型的斷裂都可在酶促反應中利用修飾的核苷酸的游離3′-OH端標記而被檢測到。這些酶末端轉脫氧核苷酰酶（TdT）可催化脫氧核糖核苷酸的模板非依賴(lài)性聚合至單鏈及雙鏈DNA的 3′-末端。這種方法也被稱(chēng)之為T(mén)UNEL(TdT-介導的 dUTP-X 缺口 末端標記)?；蛘?，游離的3′-OH基團可能通過(guò)一種稱(chēng)為切口翻譯的模板依賴(lài)機制而利用DNA聚合酶被標記。然而，TUNEL法被視為更為敏感且快速的。

特異性

TUNEL反應傾向于對在凋亡過(guò)程中產(chǎn)生的DNA鏈斷裂進(jìn)行標記。這能夠將凋亡與壞死以及由細胞增殖抑制藥物或放射誘導的主要DNA鏈斷裂進(jìn)行區分。

應用

該原位細胞死亡檢測試劑盒，熒光素法是一種精準、快速并簡(jiǎn)便的非放射性技術(shù)用于在細胞和組織中利用流式細胞儀通過(guò)熒光顯微鏡和定量檢測在單細胞水平對凋亡的細胞死亡進(jìn)行檢測和定量。[1][2]因此，該原位細胞死亡檢測試劑盒可用于多種不同的檢測系統。

特點(diǎn)和優(yōu)勢

靈敏：使用熒光素-dUTP進(jìn)行的直接標記過(guò)程可降低背景標記

快速：熒光素-dUTP的使用使得能夠在TUNEL反應后直接對樣本進(jìn)行分析

便捷：無(wú)需二級檢測系統

準確：在分子水平（DNA鏈斷裂）進(jìn)行凋亡識別并對處在凋亡極早期的細胞進(jìn)行識別