DMEM高糖培養基是一種應用十分廣泛的培養基,可用于許多哺乳動(dòng)物細胞培養,更適合高密度懸浮細胞培養。適用于附著(zhù)性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(cháng)點(diǎn)的克隆培養,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。 DMEM高糖培養基配制方法如下:
1.制備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
2.稱(chēng)取所需量的干粉培養基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個(gè)包裝的培養液,在將整個(gè)包裝的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包裝袋內面2次,倒入培養液中,以保證所有干粉都溶解成培養液。磁力攪拌或人工攪拌使之*溶解。
3.根據包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據實(shí)驗需要,添HEPES、谷氨酰胺和其他特殊物質(zhì)。
4.加水定容到終體積。
5.必要時(shí)用1mol/L鹽酸和1mol/L氫氧化鈉調節pH。
6.用無(wú)菌0.22um濾膜過(guò)濾除菌,分裝于無(wú)菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
DMEM高糖培養基注意事項:
1、使用產(chǎn)品時(shí)應注意無(wú)菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(cháng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
DMEM高糖培養基應用:
*原用于鼠胚胎細胞的培養;
*支持絕大多數細胞系的生長(cháng);
*支持肝細胞(老鼠),內皮細胞培養;
*一般建議使用10%FBS培養細胞。