細胞爬片又名玻片,是指讓玻片浸在細胞培養基內,細胞在玻片上生長(cháng),主要用于組織學(xué),免疫組織學(xué),冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等。
除了在實(shí)驗中的使用,實(shí)驗前的準備也十分重要,讓我們一起來(lái)看看使用前需要做哪些準備吧!
用前準備:
1、蓋玻片的選擇
爬片可用一般的蓋玻片,也可用專(zhuān)用細胞爬片,價(jià)格比較昂貴但是細胞貼壁牢固,拍出照片效果好;
2、爬片的剪裁
可根據自己的需要,到染色時(shí)再將之切開(kāi),這樣既保證了細胞均一性,又可同時(shí)做幾個(gè)指標的染色剪裁成合適大小,置于6孔板、12孔板或24孔板;
3、爬片的使用前處理
將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過(guò)夜,第二天先用自來(lái)水沖洗20遍,再置于無(wú)水酒清中浸泡6小時(shí),再用三蒸水沖洗3遍,放在飯盒或者玻璃培養皿中烘干后進(jìn)行高壓消毒。
高壓后取出放入烤箱中烤干,備用,烤干后可放入超凈臺中。
另外,在保存細胞爬片的時(shí)候,一般用培養皿或板,先在皿底放一層面巾紙,然后再放爬片,這樣方便做實(shí)驗時(shí)取片。
細胞爬片取出后,一般用PBS洗2遍,然后再做固定。
當然也有例外,比如做凋亡的TUNEL染色時(shí)就避免洗,因為凋亡的細胞在洗的過(guò)程中有可能會(huì )脫落。
然后蓋上蓋子,并在蓋子上做標記,為避免混淆,可用透明膠帶將蓋子和皿連在一起。一般-20℃保存2-3個(gè)月的片子做免疫組化是沒(méi)有問(wèn)題的。