PDA培養基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的簡(jiǎn)稱(chēng),即Potato Dextrose Agar (Medium),依次對應馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。
特點(diǎn)及用途:
一種常用的培養基,宜培養酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌
按物理性狀劃分:固體培養基
按培養基成分劃分:半合成培養基
PDA培養基的配制
(1)稱(chēng)量和熬煮
按培養基配方逐一稱(chēng)取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。
(2)加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂溶解后,再補充水分至所需量。
(3)分裝
按實(shí)訓要求,將配制的培養基分裝入試管或500ml三角瓶?jì)?。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成污染。
分裝量:固體培養基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶?jì)纫圆怀^(guò)其容積的一半為宜;半固體培養基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
培養基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養基內造成污染,并保證有良好的通氣性能。
(5)包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線(xiàn)繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明培養基名稱(chēng)、組別、配制日期。
其他事項:
1.培養基經(jīng)滅菌后,必須放在37℃溫箱培養24h,無(wú)菌生長(cháng)方可使用。
2.PDA培養基一般不需要調pH。對于要調節pH的培養基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏堿時(shí),可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調節。調節時(shí)應逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過(guò)酸或過(guò)堿破壞培養基成分。
3.培養基在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體培養基,用于菌類(lèi)的震蕩培養。
4.培養基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L培養基,主要是為了抑制細菌的生長(cháng),減少干擾性。