基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長(cháng)因子。在室溫條件下,基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養和分化。
凝膠制備方法
1)基質(zhì)膠融化后,用預冷的槍頭混勻基質(zhì)膠。
2)將需要使用的培養板置于冰上,然后將培養的細胞與基質(zhì)膠混合,用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長(cháng)面積的濃度加入基質(zhì)膠制備3D培養使用的凝膠。
3)在37℃放置30min,此時(shí)即可加入細胞培養液。