DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基，高糖型有利于細胞停泊于一個(gè)位置生長(cháng)，適于生長(cháng)較快、附著(zhù)較困難腫瘤細胞等。該類(lèi)培養基廣泛應用于疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養及單一細胞培養；如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細胞系的培養。
1 制備新鮮三蒸水或超純水。
2 稱(chēng)取所需量的干粉培養基，加入約終體積一半的三蒸水中；若配制一個(gè)包裝的培養液，在將整個(gè)包裝的干粉倒入三蒸水后，需用水洗包裝袋內面2次，倒入培養液中，以保證所有干粉都溶解成培養液。磁力攪拌或人工攪拌使之*溶解。
3 根據包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉；根據實(shí)驗需要，添HEPES(5-20mmol/L)、谷氨酰胺和其他特殊物質(zhì)。
4 加水定容到終體積。
5 必要時(shí)用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調節pH。
6 用無(wú)菌0.22um濾膜過(guò)濾除菌，分裝于無(wú)菌血清瓶中，4℃冰箱保存。
配制好的培養液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL鏈霉素，并根據需要加入血清(5%-20%)。
DMEM高糖培養基的特點(diǎn)：
?。?）氨基酸含量為依格爾培養基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等；
?。?）維生素含量為依格爾培養基的4倍；
?。?）含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸；
?。?）含有微量的鐵離子。
DMEM高糖培養基應用廣泛，基于DMEM培養基中氨基酸、微生物含量豐富，并具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe離子，因此在細胞培養、疫苗生產(chǎn)等方面的應用為常見(jiàn)。
