二甲基亞砜簡(jiǎn)稱(chēng)DMSO。是一種含硫的有機物,能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等有機物。常溫下為無(wú)色無(wú)臭的透明液體。細胞培養試驗中,DMSO一般用作藥物溶劑,要求染毒時(shí)其濃度不超過(guò)0.1%。也配制成高濃度的母液,稀釋時(shí)取少量到培養基中,而細胞凍存時(shí)DMSO的濃度一般為10%。另外DMASO也是一種一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。
二甲基亞砜DMSO的用途:
1、DMSO廣泛應用在人、動(dòng)物細胞株及細菌噬菌體λ的低溫防護中。
2、DMSO作為緩沖液的成分,用于以下的實(shí)驗:Poly(A+)RNA的純化, E. coli感受態(tài)細胞轉化、PCR反應、cDNA文庫的擴增、DNA測序、DEAE-葡聚糖介導的細胞轉染、聚凝胺介導的DNA轉染。
3、DMSO回收膜過(guò)濾后的DNA,用于接下來(lái)的PCR擴增反應。
4、用于DNA測序的毛細管電泳技術(shù)將5% DMSO (v/w)混入2 M尿素中,如果需要可以調整DMSO濃度到100%。
5、不同濃度的DMSO與寡核苷酸的熔點(diǎn)溫度關(guān)系。
6、低溫冷凍前用含有DMSO的培養基高溫培養雜交瘤細胞。
7、利用DMSO修飾蛋白中的磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸殘基用作磷酸化狀態(tài)的質(zhì)譜分析(MS)。
DMSO在細胞凍存中的應用
二甲基亞砜是一種重要的滲透型細胞保護劑。在深低溫(零下200度)保存細胞時(shí)凍存過(guò)程中,為防止細胞內液冰晶形成、滲透壓改變、細胞結構紊亂等導致的損傷,有必要使用含有DMSO冷凍保護劑。DMSO能夠快速穿透細胞膜進(jìn)入細胞中,降低冰點(diǎn)、延緩凍存過(guò)程,同時(shí)提高細胞內離子濃度,減少細胞內冰晶的形成,從而減少細胞損傷。深低溫時(shí)二甲基亞砜的細胞毒性受到抑制。復蘇時(shí)動(dòng)作要快,盡快洗掉二甲基亞砜,否則會(huì )造成對細胞嚴重的毒性。二甲基亞砜(DMSO)是目前zuihao的細胞凍存保護劑,但也是一種以細胞毒性很大的化學(xué)試驗劑。研究結果表明,培養液中DMSO濃度為10%時(shí),細胞生長(cháng)抑制率近100%;1‰濃度時(shí)抑制率為35%,即使是0.04‰的濃度,DMSO對細胞的生長(cháng)也有不利的影響。