制備及其進(jìn)展
方法：提取基因組DNA作為模板，通過(guò)PCR擴增得到酶基因，經(jīng)DNA體外重組構建表達質(zhì)粒。結果：實(shí)現在大腸桿菌中的表達，并成功轉化黃原膠菌株。轉化過(guò)程提示黃原膠菌株可能具有某些特殊性。

建立了一種經(jīng)濟、簡(jiǎn)便的一步酶法，大量合成尿苷二磷酸葡萄糖。在酶法合成中，用UTP代替ATP，并建立了UTP的再生系統；建立了反復補加法和酶回收法，使酶的利用率達到最高。
黃原膠是由野油菜黃單胞菌（Xanthomonascampestris）分泌的胞外雜多糖，是目前產(chǎn)量最高的微生物多糖之一，具有假塑性、溫度和pH穩定性，以及與鹽類(lèi)良好的相容性，廣泛應用于食品、石油、化工、醫藥等領(lǐng)域。國外關(guān)于黃原膠的研究從20世紀60年代起步，國內自70年代開(kāi)始，包括菌種選育、發(fā)酵工藝研究、黃原膠理化性質(zhì)探討及其免疫學(xué)活性分析等。經(jīng)查閱資料發(fā)現，在黃原膠的合成過(guò)程中，含糖的底物需要尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶（uridinediphosphateglucosedehydrogenase，UDPGD）的催化才能生成葡萄糖醛酸，而后者是黃原膠生物合成的前體之一。故此，我們設想以黃原膠菌株基因組DNA為模板，通過(guò)合成引物、擴增、克隆得到UDPGD基因，在實(shí)現大腸桿菌的表達后，再轉入原黃原膠菌株，希望UDPGD酶量的增加能夠帶來(lái)黃原膠產(chǎn)量增加的正效應。文獻報道UDPGD基因全長(cháng)1338bp，285bp處含PstⅠ切點(diǎn)，740bp處含BamHⅠ切點(diǎn)，編碼445個(gè)氨基酸，蛋白相對分子質(zhì)量48432。經(jīng)過(guò)實(shí)驗，我們對UDPGD的研究工作取得了初步結果。