做細胞生物學(xué)實(shí)驗，細胞鋪板大概是最常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗了。但是有很多人不是很得要領(lǐng)，鋪得不是均勻： 要么中間密周?chē)?，要么周?chē)苤虚g禿頂。

一般 96 孔板每孔是加 100 微升細胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入。加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下，再繼續加剩余的半邊板子。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣。

注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強或次數太多會(huì )導致細胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養箱。

6 孔板、12 孔板或 24 孔 板，均采用將第一個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底。然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底。其它孔一次類(lèi)推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細胞懸液會(huì )平鋪在整個(gè)孔底。

加細胞懸液的時(shí)候可以避免加在中間中間細胞多，而加在周邊晃勻后周邊細胞多中間少的現象，細胞分散較均勻，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。

這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒(méi)有 96 孔板好掌握，效果沒(méi)有 96 孔板好，所以放棄改用浸潤孔底的方法。

細胞懸液加完后，將細胞培養板抬高，對著(zhù)燈光，從底部往上看，看細胞有沒(méi)有抱團。然后從底部敲擊，使之分散。

如果實(shí)驗室有平板振蕩器的話(huà)，建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下，效果不錯，就是振幅小，頻率高的那種。

細胞要盡量打散，大部分呈單個(gè)狀態(tài)。離心后，要充分懸??！還有轉移到六孔板后，是要晃得?；蔚臅r(shí)候最好不要讓那個(gè)細胞液轉圈，不然細胞就全被帶到中間去了，就會(huì )不均勻。

一瓶細胞長(cháng)滿(mǎn)后，正常處理，在培養瓶里吹勻。然后鋪 6 孔板，每孔 2 毫升，鋪完之后不用觀(guān)察直接用酒精棉擦拭。然后放到培養箱里，輕微的左三圈、右三圈、前三圈、后三圈?；旧?24 小時(shí)之后觀(guān)察每孔的細胞都會(huì )很均勻。

計算好所需要的全部液體量和細胞量，混勻后，加到六孔板里，六孔板按橫 8 字型晃。顯微鏡下觀(guān)察，如果不均勻，按上述方法再晃。如果細胞未計數直接種的話(huà)，在種六孔板的過(guò)程中，隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子，瓶子我通常是順時(shí)針或逆時(shí)針轉圈。

放在水平板面上先上下移動(dòng)，再左右移動(dòng)，每個(gè)方向5到6次，但關(guān)鍵的是搖完后最好直接放入培養箱中，不要再做過(guò)多的運動(dòng)，例如放到鏡下去看，否則很容易就又聚到中間去了。