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菌種保存的幾種常用方法
  • 發(fā)布日期:2021-06-02      瀏覽次數:1554
    • 微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過(guò)程中,必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài),才能在一定的時(shí)間內使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。
       
      低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個(gè)因素而設計的。
       
      保藏方法大致可分為以下幾種:
       
      1.傳代培養保藏法 
      又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(后者作保藏厭氧細菌用),培養后于4—6℃冰箱內保存。
       
      2.液體石蠟覆蓋保藏法
      是傳代培養的變相方法,能夠適當延長(cháng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
       
      3.載體保藏法 
      是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
       
      4.寄主保藏法 
      用于目前尚不能在人工培養基上生長(cháng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
       
      5.冷凍保藏法
      可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
       
      6.冷凍干燥保藏法
      先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥)。 
      有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來(lái)制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類(lèi)、甘油、二甲亞砜等。

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