細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具,形狀、規格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養板而苦惱?你對如何處理培養板是否也有困惑?對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會(huì )?
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型);培養孔的孔數有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質(zhì)的不同有 Terasaki 板和普通細胞培養板。具體選擇時(shí)根據培養細胞的類(lèi)型、所需培養體積及不同的實(shí)驗目的而定。
平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇
不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類(lèi)型的細胞都可用,但當細胞數目較少,如做克隆時(shí),就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等實(shí)驗時(shí),無(wú)論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。這樣便于鏡下觀(guān)測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致,還便于 MTT 檢測。
至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當做兩種不同淋巴細胞混合培養時(shí),需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要 U 型板,因細胞會(huì )由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內。V 型板的用途更少,一般用于細胞殺傷實(shí)驗時(shí),為了使效靶細胞緊密接觸,常使用 V 型板,但這種實(shí)驗也可用 U 型板替代(加入細胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底還可以拿來(lái)做分析、化學(xué)反應、同位素摻入的實(shí)驗或是保存樣品用。
孔數的選擇
流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,細胞爬片一般用 24 孔等,要具體根據你的實(shí)驗來(lái)定。
Terasaki 板和普通細胞培養板的區別
Terasakiplate 主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設計便于對晶體的觀(guān)察與結構分析。有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應用產(chǎn)品的外形結構也不同,材料上選擇 crystal class polymer,特殊的材料有利觀(guān)察晶體結構。
細胞培養板主要材料是 treated sufface,便于細胞貼壁生長(cháng)與伸展。當然還與浮游細胞的生長(cháng)材料,降低結合表面積有關(guān),取決于實(shí)驗材料上的應用與對材料的選擇。
細胞培養板與酶標板的區別
用多孔細胞培養板測吸光度肯定可以,可以用它來(lái)做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。
區別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來(lái)測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì )影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實(shí)驗的目的不同靈活掌握。
培養器皿 | 面積(cm2) | 培養液量(ml) | 細胞量 |
96 孔培養板 | 0.32 | 0.1 | 105 |
24 孔培養板 | 2 | 1.0 | 5×105 |
12 孔培養板 | 4.5 | 2.0 | 106 |
6 孔培養板 | 9.6 | 2.5 | 2.5×106 |
3.5 cm 培養皿 | 8 | 3.0 | 2×106 |
6 cm 培養皿 | 21 | 5.0 | 5.2×106 |
10 cm 培養皿 | 55 | 10.0 | 13.7×106 |
25 cm2 培養瓶 | 25 | 5.0 | 5×106 |
75 cm2 培養瓶 | 75 | 15~30 | 2×107 |