一旦您在細胞培育的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀(guān)察培育基是否混濁,然后,在鏡下觀(guān)察培育細胞生長(cháng)的 狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。假如細胞被污染,微生物則會(huì )大量繁衍,培育基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包含細菌污染、 支原體污染等。
假如在鏡下觀(guān)察細胞,生長(cháng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)呈現前相比。沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的呈現可能與以下幾種狀況有關(guān):
1、細胞生長(cháng)過(guò)老,破碎的細胞殘骸;
2、血清質(zhì)量不好,反復凍融的成果;
3、制造培育基的pH值偏高,不宜細胞生長(cháng);
4、制造培育基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);
5、培育原代細胞中呈現小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
細胞培育中怎么防止黑點(diǎn)生成?
1、盡可能地減少血清凍融次數。
2、培育基無(wú)需37℃水浴。
3、培育基堅持*佳PH值7.0- 7.2。
4、嚴格控制制造培育基的水質(zhì),容器定時(shí)刷洗。
5、掌握細胞傳代的*佳時(shí)機,細胞切勿生長(cháng)過(guò)老。