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如何正確存放與解凍BI胎牛血清?
  • 發(fā)布日期:2019-08-28      瀏覽次數:1505
    •    如何正確存放與解凍BI胎牛血清?
        BI胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗家尤為關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題,經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)人員從其成分中分析,在保證質(zhì)量的前提下,胎牛血清的正確存放與解凍的方法,總結如下:
        1)保存血清的方法?
        我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
        2)如何解凍血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
        我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。
        3)血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
        血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì )存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
        若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g 稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞您的過(guò)濾膜。
        4)為什么要熱滅活血清?
        加熱可以滅活補體系統。BI胎牛血清激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,培養ES 細胞,昆蟲(chóng)細胞和平滑肌細胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
        5)有必要做熱滅活嗎?
        實(shí)驗顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì )使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái),不但節省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!
        6)為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會(huì )出現少量沉淀?
        胎牛血清沒(méi)有預老化,儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應該不會(huì )影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。
        7)如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
        我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:
        解凍BI胎牛血清時(shí)請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí)請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
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